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31-去甲氧基-他克莫司的突变生物合成

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31-去甲氧基-他克莫司的突变生物合成

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产品描述
作者
方志锴;吴声栋;江红;严凌斌;连云阳;
刊物名称
中国抗生素杂志
2017
42
08
652-657

{Author}: 方志锴;吴声栋;江红;严凌斌;连云阳;

{Author Address}: 福建省微生物研究所;福建省新药(微生物)筛选重点实验室;

{Journal}: 中国抗生素杂志

{Year}: 2017

{Volume}: 42

{Issue}: 08

{Pages}: 652-657

{Keywords}: 突变生物合成;他克莫司;fkbO;框内缺失

{Abstract}: 目的通过突变生物合成获得31-去甲氧基-他克莫司。方法针对大环内酯类免疫抑制剂他克莫司的聚酮链起始底物4,5-二羟基-1-烯-环己酸(DHCHC)合成酶fkbO基因,构建基因敲除载体pFIM412-fkbO并对他克莫司产生菌Streptomyces sp.FCZ-0311 fkbO基因进行框内缺失。结果获得突变株Streptomyces sp.OD14-1,经摇瓶发酵和产物HPLC分析,该突变株完全丧失了合成他克莫司的能力。在OD14-1摇瓶发酵36h后添加DHCHC类似物反式-4-羟基环己烷羧酸,发酵6d后经HPLC-MS检测发现分子量为773的他克莫司衍生物31-去甲氧基-他克莫司。结论构建了可用于他克莫司突变生物合成的基因工程菌Streptomyces sp.OD14-1,并通过外源物质的添加获得31-去甲氧基-他克莫司。

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